登记号：

粤科成登（2）字【2016】0168

登记日期：

2016.03.22

成果名称：

EZH2高表达在鼻咽癌转移及个体化治疗中的作用及机制研究

完成单位：

南方医科大学

研究人员：

李湘平、李 刚、刘 雄、田文栋、鲁 娟、 王 路、林少雄、梁碧君、彭小红

研究时间：

2012.01 至2015.12

成果评价单位：

国家自然科学基金委员会医学科学部

成果评价日期：

2016.09.29

成果应用行业：

卫生和社会工作

高新科技领域：

学科分类：

简介：

一、课题来源与背景 鼻咽癌是我国南方及东南亚地区一种常见的恶性肿瘤，临床以低分化、高转移为主要特征。尽管目前放化疗综合治疗使鼻咽癌的局控率有明显提高，但一旦复发或转移则预后较差，远处转移仍是死亡的主要原因。最近研究发现组蛋白甲基转移酶EZH2在多种肿瘤中扮演癌基因角色，通过调控新生血管形成、上皮间充质转化等多种机制促进肿瘤转移。在前期研究中，我们发现EZH2在鼻咽癌高表达，可促进癌细胞的迁移和侵袭能力，提示EZH2促进鼻咽癌转移，但机制不明。本研究将检测EZH2表达失调对鼻咽癌转移的影响，试图证实EZH2通过诱导上皮间质转化和肿瘤血管生成促进鼻咽癌转移的可能机制，为鼻咽癌转移提供新的理论依据；通过建立可视化鼻咽癌转移动物模型，探讨慢病毒介导干扰EZH2基因治疗鼻咽癌转移的可行性；通过建立标准化鼻咽癌组织标本库，建立鼻咽癌临床资料信息库，分析EZH2 高表达与鼻咽癌临床分期、对治疗的敏感性及预后预测等指标的相关性，为实现鼻咽癌的个体化治疗提供理论和临床依据。 二、研究目的与意义 （1）明确EZH2表达失调对鼻咽癌转移能力的影响； （2）阐明EZH2通过诱导上皮间质转化和肿瘤血管生成促进鼻咽癌转移的分子机制； （3）研究慢病毒干扰EZH2基因治疗鼻咽癌转移的可行性； （4）探讨EZH2与鼻咽癌临床分期、对治疗的敏感性、预测预后等指标的相关性。 该项目的顺利实施，为全面解析鼻咽癌转移的分子机制，寻求新的抗转移及抗血管靶向治疗的分子靶标，从而实施个体化治疗控制鼻咽癌转移提高患者生存率具有 重要的临床意义。 三、主要论点与论据 （1）我们通过对135例具有完整临床资料的鼻咽癌组织标本石蜡切片进行免疫组化分析，发现EZH2高表达与鼻咽癌患者的T、N、M分期及临床分期呈正相关，与患者的生存期缩短有显著相关性，EZH2高表达可作为鼻咽癌患者预后差的独立预测指标。 （2）为研究EZH2表达失调对鼻咽癌转移能力的影响，我们通过慢病毒转染分别建立了稳定沉默和稳定过表达EZH2的鼻咽癌细胞株，并利用MTT、Transwell小室、成管实验及裸鼠肝包膜下肺转移动物模型以及鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型，证实EZH2过表达可促进鼻咽癌新生血管生成从而促进肿瘤转移。 （3）为探讨EZH2影响血管生成的可能分子机制，我们采用Angiogenesis PCR Array筛选并通过染色质免疫共沉淀证实Endothelin-1为EZH2调控血管形成的重要因子，随后证实miR-1为EZH2调控Endothelin-1表达的中间桥梁，而双荧光素酶报告基因实验表明Endothelin-1为miR-1的靶基因，细胞实验同样验证了EZH2/miR-1/Endothelin-1通路的促血管生成作用。 综上所述，我们证实EZH2在鼻咽癌高表达，其高表达可通过调控下游miR-1/Endothelin-1通路促进新生血管生成从而进一步促进鼻咽癌转移。 四、创见与创新 （1）证实EZH2表达失调通过影响血管形成参与鼻咽癌转移，并阐明EZH2通过激活miR-1/Endothelin-1通路从而促进肿瘤血管生成进而促进鼻咽癌转移的分子机制，为阐释鼻咽癌转移的分子机理提供了新的理论依据。 （2）首次研究Endothelin在鼻咽癌中表达特性及其表达失调对鼻咽癌血管形成的影响。 （3）明确干扰EZH2在动物模型上治疗鼻咽癌转移的潜在价值，为鼻咽癌抗转移治疗提供了新的分子靶标。 （4）分析EZH2表达强度与临床分期、远期预后以及病人对放化疗反应等指标的相关性，探讨EZH2作为判断鼻咽癌病人疗效、监测复发转移的预后指标的敏感性和特异性，为鼻咽癌病人的个体化治疗提供实验依据。